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服務(wù)內(nèi)容

研究某個(gè)基因的功能最常用的手段是在宿主細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或者通過(guò)RNA干擾的方法knock-down該基因，常規(guī)手段有瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和篩選穩(wěn)定細(xì)胞系。

優(yōu)勢(shì)：篩選出該基因的過(guò)表達(dá)或者RNA干擾的穩(wěn)定細(xì)胞系會(huì)給您的實(shí)驗(yàn)帶來(lái)極大的便利。有了穩(wěn)定細(xì)胞系，后期的Co-IP或者Pull-Down實(shí)驗(yàn)會(huì)非常便利；穩(wěn)定表達(dá)重組熒光蛋白的細(xì)胞系可以讓您動(dòng)態(tài)地觀察分子在細(xì)胞中的運(yùn)動(dòng)。

原理：構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選。最常用的真核表達(dá)載體的抗性篩選標(biāo)志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418來(lái)代替新霉素進(jìn)行選擇性篩選，篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。

服務(wù)流程